Иммуноблот вирус краснухи IgG :: Иммуноблот краснуха

Назначение: набор recomBlot Rubella IgG предназначен для качественного определения человеческих IgG-антител к вирусу краснухи в образцах сыворотки или плазмы методом иммуноблота с целью подтверждения результатов скрининговых тестов. Метод позволяет надежно и достоверно идентифицировать специфические антитела, которые ассоциированы с различными стадиями инфекции. Анализируемые антигены: рекомбинантные высокоочищенные белки вируса краснухи E1, E2, С. Клиническая чувствительность: 98.5% для всех образцов, а по отношению к сравнительным методам ELISA - 100%. Клиническая специфичность: 81.1%. Приложения теста: вирус краснухи является единственным представителем рода Rubivirus, принадлежащего семейству тогавирусов (Togaviridae). Впервые этот вирус был выделен в 1962 году группой ученых Parkman, Weller и Neva. Диаметр вириона составляет 60 нм. Икосаэдрический нуклеокапсид содержит одноцепочечную РНК и окружен трехслойной липидной оболочкой. Кроме того, нуклеокапсид состоит из структурных белков E1 и E2 и нуклеокапсидного белка C. У детей заболевание (коревая краснуха) передается в основном воздушно-капельным путем, инкубационный период составляет от 9 до 21 дней. Заболевание начинается с обычно неспецифического продромального периода, характеризующегося головной болью, субфебрильной температурой, воспалением верхних дыхательных путей и конъюнктивитом. Затем появляется обильная сыпь в виде бледно-розовых пятнышек круглой или овальной формы, сначала на лице, а затем распространяется по всему телу. Экзантема исчезает примерно через три дня. Это сопровождается увеличением лимфатических узлов в области шеи. Известно, что заболевание может протекать бессимптомно в 25-30% случаев и без сыпи в 40% случаев у детей и в 60% случаев у взрослых. Возможным осложнением является воспаление суставов пальцев рук, локтевых и голеностопных суставов, которое может наблюдаться у взрослых, особенно у женщин, на протяжении до 3 недель. Кроме того, возможно возникновение миокардита, неврита, отита и бронхита, а в редких случаях развивается краснушный панэнцефалит. Инфицирование матери во время беременности может привести к синдрому врожденной краснухи. Этот синдром, с классическими нарушениями развития нервной системы, сердца, глаз и органов слуха, впервые был описан австрийским офтальмологом Gregg в 1941 году. Диагностика: перед проведением серодиагностики краснухи важно, чтобы лечащий врач обратил внимание на историю перенесенных заболеваний и клинические данные пациента. Существуют четкие отличия между базовой и специальной диагностикой. Базовая диагностика краснухи представлена тестом ингибирования гемагглютинации (HAIT). В случае недавней инфекции в двух последовательно взятых образцах крови пациента в период заболевания, с интервалом от 14 дней до 3 недель, можно наблюдать повышение титра антител в 2–4 раза. При отсутствии клинических симптомов титры 1 : 32 в HAIT оцениваются как иммунитет к краснухе. В качестве альтернативы, и дополнительно для оценки иммунитета, используется набор ELISA для определения IgG-антител к краснухе. Концентрация антител 15 МЕ/мл, выявляемая в образцах сыворотки пациентов, свидетельствует о защитном уровне антител к краснухе. Концентрация 15 - 25 МЕ/мл считается находящейся в серой зоне, т.е., иммунитет пациента таков, что добавочный контакт с вирусом краснухи может привести к инфекции. Это часто наблюдается у людей после прививки, так как в среднем у них продуцируются защитные титры ниже, чем у тех людей, которые приобрели иммунитет в результате инфекции диким вирусом. Кроме того, необходимо помнить тот факт, что каждый титр HAIT может указывать на недавнюю инфекцию краснухи, так как этим методом определяются и IgG-, и IgM-антитела. Соответственно, титр HAIT 1 : 32 может теоретически быть вызван только IgM-антителами. Для дальнейшей базовой диагностики, если предполагается свежая инфекция или уровень IgG-антител к вирусу краснухи снижен, определяют уровень IgM-антител к вирусу краснухи методом ИФА (ELISA). При получении положительного результата должен быть проведен второй, независимый от определения IgM, анализ для подтверждения результата. Однако, у методов определения IgM-антител к вирусу краснухи виден ряд диагностических проблем: IgM-антитела к вирусу краснухи обычно определяются в образцах сыворотки пациентов в течение 1-2 месяцев. У некоторых пациентов, однако, они могут персистировать более продолжительное время. IgM-антитела к вирусу краснухи также могут определяться в случае повторной инфекции вирусом краснухи при беременности, при этом риск поражений очень низок. Анализ на IgM-антитела к вирусу краснухи может иногда давать ложноположительные результаты, например, при ревматических заболеваниях. Инфекция вирусом Эпштейна-Барр может приводить к выработке специфических IgM-антител к вирусу краснухи путем неспецифической поликлональной стимуляции B-лимфоцитов. При диагностике инфекции вирусом краснухи во время беременности результаты анализа на IgM-антитела к вирусу краснухи являются чрезвычайно важными для оценки риска поражения плода, возможно, приводящими к аборту по медицинским показаниям. Согласно руководствам, в случае положительных результатов теста на IgM-антитела к вирусу краснухи во время беременности, необходимо провести тестирование на IgM-антитела к вирусу краснухи другим методом. В случае, если второе тестирование дает отрицательные результаты на IgM-антитела к вирусу краснухи, должно быть тщательно проверено решение о достоверности результатов первого тестирования – положительного на IgM-антитела к вирусу краснухи. Так как, с одной стороны, первый тест мог быть более чувствительным, с другой стороны, он мог дать ложноположительные результаты по причинам, указанным выше. Данный метод recomBlot Rubella IgG рекомендован для уточнения неясных результатов при анализе IgM-антител к краснухе. Кинетика ответа IgG-антител на три структурных антигена краснухи E1, E2 и С различна. Иммунный ответ на антигены E1 и С наблюдается быстро – уже на первых неделях после инфекции или вакцинации, иммунный ответ на антигены E2 появляется значительно позже. Как правило, IgG-подтверждающие антитела против антигена E2 краснухи появляются самое раннее через 3 месяца через вакцинации или болезни. Если бэнд, соответствующий E2, присутствует, то можно исключить наличие инфицирования в последние три месяца. Пренатальная диагностика с использованием ПЦР в образцах фетальной крови может быть проведена только в специализированных лабораториях.